TABLEAU 2

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Vous pouvez consulter le tableau dans le JO no 0146 du 25/06/94 Page 9191 a 9199
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Tracez une courbe sur papier log-log en portant les valeurs de Y (1-Y) en abscisse en fonction du volume de complément dilué en millilitres en ordonnée. Construisez la meilleure droite à travers les points et notez l'ordonnée de la dose hémolytique à 50 p. 100 du complément au point où Y/(1-Y) = 1,0.
Calculez le nombre d'unités hémolytiques (CH50/ml) à l'aide de l'expression:

Ca x 5

Cd

Ca x 5

Cd = valeur inverse de la dilution de complément.
Ca = volume en millilitres de complément dilué qui produit 50 p. 100 d'hémolyse.
5 = facteur d'échelle.
L'essai n'est valable que si, entre 15 p. 100 et 85 p. 100 d'hémolyse, la courbe est une droite dont la pente se situe de 0,18 à 0,30.
Essai d'activité anticomplémentaire.
Diluez le complément de cobaye titré avec la solution tampon gélatine-barbital pour obtenir 100 CH50/ml. Ajustez l'immunoglobuline à examiner à pH 7, si nécessaire. Préparez les mélanges d'incubation suivants pour une immunolobuline contenant 50 mg/ml:

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Vous pouvez consulter le tableau dans le JO no 0146 du 25/06/94 Page 9191 a 9199
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Effectuez l'essai en parallèle sur l'immunoglobuline à examiner et sur l'immunoglobuline humaine PBR, selon les indications données dans le feuillet qui accompagne la préparation de référence pour le témoin AAC négatif et le témoin AAC positif. Si la préparation à examiner ne contient pas 50 mg/ml d'immunoglobuline, ajustez les volumes de la préparation et de solution tampon gélatine-barbital: par exemple, utilisez 0,33 ml d'une préparation qui contient 30 mg/ml d'immunoglobuline et ajoutez 0,47 ml de solution tampon gélatine-barbital pour arriver au même volume total de 0,8 ml. Fermez les tubes et faites incuber à 37 oC pendant 60 minutes. Ajoutez 0,2 ml de chaque mélange d'incubation à 9,8 ml de solution tampon gélatine-barbital pour diluer le complément. Effectuez des titrages du complément sur le contenu de chaque tube comme décrit pour déterminer l'activité complémentaire résiduelle (voir tableau 2).
Calculez l'activité anticomplémentaire de la préparation à examiner, par référence au témoin complément considéré comme étant 100 p. 100, à partir de l'expression:

a - b x 100

x 100

a

a = activité complémentaire moyenne (CH50/ml) des témoins.
b = activité complémentaire (CH50/ml) de la préparation à examiner.
L'essai n'est valable que si:
- les activités anticomplémentaires trouvées pour le témoin AAC négatif et le témoin AAC positif se situent dans les limites indiquées dans le feuillet qui accompagne la préparation de référence;
- l'activité complémentaire du témoin complément (a) est de 80 à 120 CH50/ml.