(1) Réactif décrit en annexe.

« Solution S. Chauffez à ébullition, pendant 2 minutes, 20 ml de teinture mère d'Adonis vernalis avec 5 ml de la solution d'acétate de plomb R. Après refroidissement, centrifugez le mélange. Agitez le surnageant avec 30 ml de chlorure de méthylène R (si une émulsion se forme, centrifugez). Recueillez la solution organique et séchez-la sur du sulfate de sodium anhydre R. Filtrez sur coton.

« Teneur en éthanol (2.9.10). La teneur en éthanol est comprise entre 40 % V/V et 50 % V/V.

« Résidu sec. Le résidu sec (voir la monographie PREPARATIONS HOMEOPATHIQUES) est supérieur ou égal à 1,00 %.

Dosage

« Solution à examiner. A 20 g de teinture mère d'Adonis vernalis exactement pesés, ajoutez 12 ml de la solution d'acétate basique de plomb R. Agitez puis centrifugez. Recueillez le surnageant dans une fiole jaugée de 50,0 ml. Ajoutez 5 ml d'eau au culot de centrifugation. Agitez. Centrifugez. Transférez le surnageant dans la fiole de 50,0 ml. Recommencez encore une fois l'opération. Complétez le volume à 50,0 ml avec de l'eau. Prélevez 10,0 ml de la solution et ajoutez 10,0 ml d'une solution de sulfate de sodium R à 100 g/l. Filtrez. Prélevez 10,0 ml de la solution. Ajoutez 2,0 ml de la solution d'acide dinitrobenzoïque R et 1,0 ml d'hydroxyde de sodium 1 M. Agitez. Mesurez à plusieurs reprises l'absorbance (2.2.25) à 540 nm, pendant les 12 premières minutes après la dernière addition de réactif jusqu'à ce que le maximum soit atteint, en utilisant un mélange de 10,0 ml d'eau, 2,0 ml de la solution d'acide dinitrobenzoïque R et 1,0 ml d'hydroxyde de sodium 1 M comme liquide de compensation.

« Solution témoin. Dissolvez 10,0 mg de cymarine dans 20 ml d'alcool R et complétez à 100,0 ml avec de l'eau R. Prélevez 5,0 ml et complétez à 20,0 ml avec de l'eau R. A 10,0 ml de solution, ajoutez 2,0 ml de la solution d'acide dinitrobenzoïque R et 1,0 ml d'hydroxyde de sodium 1 M. Agitez. Mesurez l'absorbance (2.2.25) à 540 nm, pendant les 12 premières minutes après la dernière addition de réactif, jusqu'à ce que le maximum soit atteint en utilisant un mélange de 10,0 ml d'eau, 2,0 ml de la solution d'acide dinitrobenzoïque R et 1,0 ml d'hydroxyde de sodium 1 M comme liquide de compensation.

« Calculez la teneur % en hétérosides cardiotoniques, exprimés en cymarine, à l'aide de l'expression :

A1 x m2 x 25

A2 x m1

« m1 = masse de la prise d'essai de teinture mère, en grammes ;

« m2 = masse de cymarine, en grammes ;

« A1 = absorbance de la solution à examiner à 540 nm ;

« A2 = absorbance de la solution témoin à 540 nm.

« Réactif

« Cymarine. C30H44O9 (Mr 548,6).

« Aiguilles blanches, pratiquement insolubles dans l'eau, solubles dans le chloroforme et dans le méthanol.

« F : 148 oC. »