Identification

A. - A 1 ml de la teinture mère de Grindelia, ajoutez 1 ml d'eau. Il se produit un trouble laiteux (résines).
B. - Extrayez 5 ml de la teinture mère de Grindelia avec 5 ml d'hexane R.
Evaporez la phase organique et reprenez le résidu avec 1 ml de chloroforme R. Ajoutez 4 ml d'anhydride acétique R puis une goutte d'acide sulfurique R. Il se produit une coloration jaune d'or (dérivés diterpéniques).
C. - A 1 ml de la teinture mère de Grindelia, ajoutez une goutte de la solution concentrée d'hydroxyde de sodium R. Il apparaît une coloration rouge orangé.
D. - Opérez par chromatographie sur couche mince (2.2.27) en utilisant une plaque recouverte d'un gel de silice approprié.
Solution à examiner. Teinture mère de Grindelia à examiner.
Solution témoin. Dissolvez 5 mg de lutéoline R dans l'alcool R et complétez à 10 ml avec le même solvant.
Déposez séparément sur la plaque, en bandes, 20 ml de la solution à examiner et 10 ml de la solution témoin. Développez sur un parcours de 10 cm avec un mélange de 10 volumes d'acide formique anhydre R, de 10 volumes d'eau et de 80 volumes d'acétate d'éthyle R. Laissez sécher la plaque à l'air. Examinez en lumière ultraviolette à 365 nm. Le chromatogramme obtenu avec la solution à examiner présente une bande de fluorescence brune de Rf voisin de 0,90 semblable quant à sa position et sa fluorescence à la bande principale du chromatogramme obtenu avec la solution témoin. Il présente également 3 à 5 bandes de fluorescence bleue de Rf compris entre 0,30 et 0,60, une bande de fluorescence bleu-vert de Rf voisin de 0,85 et une bande de fluorescence rouge voisine du front du solvant. Pulvérisez une solution de diphénylborate d'aminoéthanol R à 10 g/l et de macrogol 400 R à 50 g/l dans le méthanol R.
Examinez en lumière ultraviolette à 365 nm. Le chromatogramme obtenu avec la solution à examiner présente une bande de fluorescence orange de Rf voisin de 0,90 semblable quant à sa position et sa fluorescence à la bande du chromatogramme obtenu avec la solution témoin. Il présente également une bande de fluorescence jaune de Rf voisin de 0,40 et deux bandes de fluorescence jaune-vert à un Rf voisin de 0,45 et 0,75.
E. - Opérez par chromatographie sur couche mince (2.2.27) en utilisant une plaque recouverte d'un gel de silice approprié.
Solution à examiner. Teinture mère de Grindelia à examiner.
Solution témoin. Dissolvez 100 mg d'acide abiétique R dans l'alcool R et complétez à 10 ml avec le même solvant.
Déposez séparément sur la plaque, en bandes, 20 ml de la solution à examiner et 10 ml de la solution témoin. Développez sur un parcours de 10 cm avec un mélange de 10 volumes de méthanol R et de 90 volumes de chlorure de méthylène R. Laissez sécher la plaque à l'air. Pulvérisez le réactif à la vanilline sulfurique R et chauffez à 100-105 oC pendant 10 min. Examinez à la lumière du jour. Le chromatogramme obtenu avec la solution à examiner présente plusieurs bandes violettes dont la principale a un Rf légèrement inférieur à celui de la bande principale du chromatogramme obtenu avec la solution témoin.