JORF n°272 du 22 novembre 1996

Identification

A. - A 1 ml de la teinture mère de Ruscus aculeatus, ajoutez 4 ml d'eau.
Agitez. Il se forme une mousse persistante (saponosides).
B. - A 1 ml de la teinture mère de Ruscus aculeatus, ajoutez 1 ml d'acide sulfurique R. Il se forme un anneau rouge. Mélangez avec précaution. Il apparaît une coloration rouge sombre (saponosides et ruscogénines).
C. - Opérez par chromatographie sur couche mince (2.2.27) en utilisant une plaque recouverte d'un gel de silice approprié.
Solution à examiner. Teinture mère de Ruscus aculeatus à examiner.
Déposez sur la plaque, en bande, 30 ml de la solution à examiner. Développez sur un parcours de 10 cm avec un mélange de 6 volumes d'eau, de 9 volumes de méthanol R, de 24 volumes d'acide acétique glacial R et de 45 volumes de chlorure de méthylène R. Laissez sécher la plaque à l'air. Examinez en lumière ultraviolette à 365 nm. Le chromatogramme obtenu avec la solution à examiner présente généralement une succession de bandes de fluorescence bleue plus ou moins intense de Rf compris entre 0,20 et 0,70.
D. - Opérez par chromatographie sur couche mince (2.2.27) en utilisant une plaque recouverte d'un gel de silice approprié.
Solution à examiner. A 10 ml de teinture mère de Ruscus aculeatus, ajoutez 1 ml d'acide chlorhydrique R. Chauffez à reflux au bain-marie pendant 1 h.
Après refroidissement, ajoutez 10 ml d'eau puis extrayez avec 2 fois 10 ml de chlorure de méthylène R. Séchez les phases organiques réunies sur du sulfate de sodium anhydre R, puis évaporez-les à siccité sous pression réduite.
Reprenez le résidu avec 5 ml d'alcool R.
Solution témoin. Dissolvez 10 mg de ruscogénine R dans le méthanol R et complétez à 10 ml avec le même solvant.
Déposez séparément sur la plaque, en bandes, 20 ml de la solution à examiner et 10 ml de la solution témoin. Développez sur un parcours de 10 cm avec un mélange de 20 volumes de cyclohexane R et de 80 volumes d'acétate d'éthyle R. Laissez sécher la plaque à l'air. Pulvérisez le réactif à la vanilline sulfurique R, puis chauffez à 100-105 oC pendant 10 min. Examinez à la lumière du jour. Le chromatogramme obtenu avec la solution à examiner présente une bande brune de Rf voisin de 0,30 semblable quant à sa position et à sa coloration à la bande principale du chromatogramme obtenu avec la solution témoin.

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Identification

A. - A 1 ml de la teinture mère de Ruscus aculeatus, ajoutez 4 ml d'eau.

Agitez. Il se forme une mousse persistante (saponosides).

B. - A 1 ml de la teinture mère de Ruscus aculeatus, ajoutez 1 ml d'acide sulfurique R. Il se forme un anneau rouge. Mélangez avec précaution. Il apparaît une coloration rouge sombre (saponosides et ruscogénines).

C. - Opérez par chromatographie sur couche mince (2.2.27) en utilisant une plaque recouverte d'un gel de silice approprié.

Solution à examiner. Teinture mère de Ruscus aculeatus à examiner.

Déposez sur la plaque, en bande, 30 ml de la solution à examiner. Développez sur un parcours de 10 cm avec un mélange de 6 volumes d'eau, de 9 volumes de méthanol R, de 24 volumes d'acide acétique glacial R et de 45 volumes de chlorure de méthylène R. Laissez sécher la plaque à l'air. Examinez en lumière ultraviolette à 365 nm. Le chromatogramme obtenu avec la solution à examiner présente généralement une succession de bandes de fluorescence bleue plus ou moins intense de Rf compris entre 0,20 et 0,70.

D. - Opérez par chromatographie sur couche mince (2.2.27) en utilisant une plaque recouverte d'un gel de silice approprié.

Solution à examiner. A 10 ml de teinture mère de Ruscus aculeatus, ajoutez 1 ml d'acide chlorhydrique R. Chauffez à reflux au bain-marie pendant 1 h.

Après refroidissement, ajoutez 10 ml d'eau puis extrayez avec 2 fois 10 ml de chlorure de méthylène R. Séchez les phases organiques réunies sur du sulfate de sodium anhydre R, puis évaporez-les à siccité sous pression réduite.

Reprenez le résidu avec 5 ml d'alcool R.

Solution témoin. Dissolvez 10 mg de ruscogénine R dans le méthanol R et complétez à 10 ml avec le même solvant.

Déposez séparément sur la plaque, en bandes, 20 ml de la solution à examiner et 10 ml de la solution témoin. Développez sur un parcours de 10 cm avec un mélange de 20 volumes de cyclohexane R et de 80 volumes d'acétate d'éthyle R. Laissez sécher la plaque à l'air. Pulvérisez le réactif à la vanilline sulfurique R, puis chauffez à 100-105 oC pendant 10 min. Examinez à la lumière du jour. Le chromatogramme obtenu avec la solution à examiner présente une bande brune de Rf voisin de 0,30 semblable quant à sa position et à sa coloration à la bande principale du chromatogramme obtenu avec la solution témoin.