JORF n°301 du 28 décembre 1990

Dosage

Opérez par chromatographie liquide (V.6.20.4).
Solution à examiner. A 1 g de sommité fleurie d'aubépine pulvérisée, ajoutez 50 ml de méthanol R, chauffez au bain-marie à 60oC sous agitation pendant 30 minutes. Laissez décanter et filtrez. Mettez de côté le filtrat et reprenez le résidu avec 50 ml de méthanol R; traitez comme précédemment. Réunissez les filtrats et évaporez à sec sous pression réduite à une température inférieure à 50oC. Au résidu obtenu après évaporation, ajoutez du méthanol R et complétez à 50,0 ml dans une fiole jaugée avec le même solvant. Diluez 1 ml de cette solution dans 5,0 ml de la phase mobile.
Solution témoin. Dissolvez 1,0 mg de vitexine-2" rhamnoside R et 2,5 mg d'hypéroside R dans la phase mobile et complétez à 50,0 ml avec la phase mobile.
La chromatographie peut être réalisée à l'aide de:
- une colonne d'acier inoxydable d'une longueur de 250 mm et d'un diamètre intérieur de 4,6 mm, remplie de gel de silice, régulière, doublement greffée par l'octadécylsilane pour chromatographie R (5 m m), conservée à une température de 15-25oC;
- une phase mobile composée d'un mélange de 80 volumes d'eau, de 20 volumes de tétrahydrofuranne R, de 5 volumes de propanol-2 R et de 1 volume d'acide phosphorique R à un débit de 1 ml par minute;
- un spectrophotomètre réglé à 340 nm;
- un injecteur à boucle.
Le dosage n'est valable que si:
- le coefficient de distribution massique n'est pas inférieur à 1,0 pour la vitexine-2" rhamnoside et à 2,6 pour l'hypéroside;
- le coefficient de sélectivité vitexine-2" rhamnoside, hypéroside n'est pas inférieur à 2,0;
- le nombre de plateaux théoriques n'est pas inférieur à 6000 pour la vitexine-2" rhamnoside et à 5500 pour l'hypéroside.
Injectez 10 m l de chacune des solutions.
Comparez les surfaces des pics du chromatogramme obtenu avec la solution à examiner avec celles obtenues avec la solution témoin et déterminez la teneur en vitexine-2" rhamnoside et en hypéroside de la solution à examiner.
Calculez la teneur p. 100 en vitexine-2" rhamnoside et en hypéroside à l'aide de l'expression:

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Dosage

Opérez par chromatographie liquide (V.6.20.4).

Solution à examiner. A 1 g de sommité fleurie d'aubépine pulvérisée, ajoutez 50 ml de méthanol R, chauffez au bain-marie à 60oC sous agitation pendant 30 minutes. Laissez décanter et filtrez. Mettez de côté le filtrat et reprenez le résidu avec 50 ml de méthanol R; traitez comme précédemment. Réunissez les filtrats et évaporez à sec sous pression réduite à une température inférieure à 50oC. Au résidu obtenu après évaporation, ajoutez du méthanol R et complétez à 50,0 ml dans une fiole jaugée avec le même solvant. Diluez 1 ml de cette solution dans 5,0 ml de la phase mobile.

Solution témoin. Dissolvez 1,0 mg de vitexine-2" rhamnoside R et 2,5 mg d'hypéroside R dans la phase mobile et complétez à 50,0 ml avec la phase mobile.

La chromatographie peut être réalisée à l'aide de:

- une colonne d'acier inoxydable d'une longueur de 250 mm et d'un diamètre intérieur de 4,6 mm, remplie de gel de silice, régulière, doublement greffée par l'octadécylsilane pour chromatographie R (5 m m), conservée à une température de 15-25oC;

- une phase mobile composée d'un mélange de 80 volumes d'eau, de 20 volumes de tétrahydrofuranne R, de 5 volumes de propanol-2 R et de 1 volume d'acide phosphorique R à un débit de 1 ml par minute;

- un spectrophotomètre réglé à 340 nm;

- un injecteur à boucle.

Le dosage n'est valable que si:

- le coefficient de distribution massique n'est pas inférieur à 1,0 pour la vitexine-2" rhamnoside et à 2,6 pour l'hypéroside;

- le coefficient de sélectivité vitexine-2" rhamnoside, hypéroside n'est pas inférieur à 2,0;

- le nombre de plateaux théoriques n'est pas inférieur à 6000 pour la vitexine-2" rhamnoside et à 5500 pour l'hypéroside.

Injectez 10 m l de chacune des solutions.

Comparez les surfaces des pics du chromatogramme obtenu avec la solution à examiner avec celles obtenues avec la solution témoin et déterminez la teneur en vitexine-2" rhamnoside et en hypéroside de la solution à examiner.

Calculez la teneur p. 100 en vitexine-2" rhamnoside et en hypéroside à l'aide de l'expression: